Abstract
Cytisine, een chinolizidine-alkaloïde, is een van de belangrijkste bioactieve componenten die worden aangetroffen in de kleine boom Sophora Alopecuraides L., en is een traditioneel Chinees medicijn dat wordt gebruikt voor de behandeling van hepatitis en leverkanker. In de jaren zestig werd gemeld dat chinolizidine-alkaloïden remmende effecten hadden op de proliferatie van tumorcellen in verschillende soorten kankercellen. Er zijn echter weinig studies die het effect van cytisine op leverkanker hebben onderzocht. Ons team bevestigde dat cytisine apoptose induceerde in HepG2-cellen via een mitochondriale route. Het primaire doel van de huidige studie was het evalueren van de endoplasmatisch reticulum (ER) -stress veroorzaakt door calciumoverbelasting in cytisine-geïnduceerde apoptose in HepG2-cellen en de moleculaire mechanismen van dit fenomeen. Bovendien werd de huidige studie uitgevoerd om de expressie van α7-nAChR te evalueren wanneer apoptose werd geïnduceerd door cytisine in HepG2-cellen. In de huidige studie werd transmissie-elektronenmicroscopie gebruikt om het morfologische uiterlijk van HepG2-cellen te observeren. De apoptose van de cellen met cytoplasmatische vacuolisatie was significant onder elektronenmicroscopie. Apoptotische lichamen, de uitbreiding van het ER en zwelling van mitochondriën werden waargenomen in de HepG2-cellen na behandeling met cytisine. Flowcytometrische analyse toonde aan dat de apoptosesnelheid van HepG2-cellen werd opgereguleerd. Bovendien werd de intracellulaire calciumconcentratie gedetecteerd door laser confocale fluorescentiemicroscopie. De laser confocale fluorescentiemicroscopie toonde aan dat de calciumconcentratie dosisafhankelijk was verhoogd. De activiteit van caspase ‑ 4 werd geëvalueerd door een enzymgekoppelde analysator, en de expressieniveaus van CHOP, JNK, p ‑ JNK en α7 ‑ nAChR werden bepaald via Western blot-analyse. In de huidige studie hebben we waargenomen dat cytisine ER-stress-inducerende factoren en CHOP- en p-JNK1 / 2-eiwitexpressie induceerde, en het verhoogde de JNK-eiwitexpressie in de HepG2-cellen. Bovendien werd α7-nAChR-eiwitexpressie op een dosisafhankelijke manier bevorderd na behandeling met cytisine. Deze bevindingen suggereren dat cytisine de ER-stress-gemedieerde apoptotische route induceerde via activering van CHOP, JNK en caspase-4 in HepG2-cellen, en cytisine is een potentiële nieuwe doelwitverbinding voor nAchR’s (nicotine-acetylcholinereceptoren) om leverkanker te behandelen.