Resumen
La citisina, un alcaloide de quinolizidina, es uno de los principales componentes bioactivos que se encuentran en el árbol pequeño Sophora Alopecuraides L., y es una medicina tradicional china que se utiliza para tratar la hepatitis y el cáncer de hígado. En la década de 1960, se informó que los alcaloides de quinolizidina exhibían efectos inhibidores sobre la proliferación de células tumorales en varios tipos de células cancerosas. Sin embargo, pocos estudios han investigado el efecto de la citisina sobre el cáncer de hígado. Nuestro equipo confirmó que la citisina inducía la apoptosis en las células HepG2 a través de una vía mitocondrial. El objetivo principal del presente estudio fue evaluar el estrés del retículo endoplásmico (RE) causado por la sobrecarga de calcio en la apoptosis inducida por citisina en células HepG2 y los mecanismos moleculares de este fenómeno. Además, el presente estudio se llevó a cabo para evaluar la expresión de α7-nAChR cuando la apoptosis fue inducida por citisina en células HepG2. En el presente estudio, se utilizó microscopía electrónica de transmisión para observar el aspecto morfológico de las células HepG2. La apoptosis de las células con vacuolización citoplásmica fue significativa bajo microscopía electrónica. Se observaron cuerpos apoptóticos, la expansión del RE y la inflamación de las mitocondrias en las células HepG2 después del tratamiento con citisina. El análisis de citometría de flujo demostró que la tasa de apoptosis de las células HepG2 estaba regulada al alza. Además, la concentración de calcio intracelular se detectó mediante microscopía de fluorescencia confocal láser. La microscopía láser de fluorescencia confocal mostró que la concentración de calcio aumentaba de manera dosis-dependiente. La actividad de la caspasa-4 se evaluó mediante un analizador ligado a enzimas, y los niveles de expresión de CHOP, JNK, p-JNK y α7-nAChR se evaluaron mediante análisis de transferencia Western. En el presente estudio, observamos que la citisina inducía los factores inductores de estrés del ER y la expresión de las proteínas CHOP y p-JNK1 / 2, y aumentaba la expresión de la proteína JNK en las células HepG2. Además, la expresión de la proteína α7-nAChR se promovió de una manera dependiente de la dosis después del tratamiento con citisina. Estos hallazgos sugieren que la citisina indujo la vía apoptótica mediada por estrés del ER a través de la activación de CHOP, JNK y caspasa-4 en las células HepG2, y la citisina es un nuevo compuesto potencial para los nAchR (receptores nicotínicos de acetilcolina) para tratar el cáncer de hígado.